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干细胞治疗骨疾病临床研究

时间:2021-06-01 15:35  来源:未知     作者:南医大黄老师  点击:

       20世纪70年代中期,Friedestein等首次报道骨髓标本中的小部分贴附细胞在培养过程中能够分化形成多种细胞,而且这些贴附细胞经过20~30个培养周期仍能保持其多向分化的潜能,这类细胞被称之为间充质干细胞(MSC)。MSC又被称为成纤维细胞集落形成单位(CFB@F)或间质祖细胞(MPCs)。研究证实,MSC是具有多向分化潜能的原始骨髓细胞,在特定的条件下可向成骨细胞、软骨细胞、肌腱、脂肪细胞、骨髓基质细胞、血管内皮细胞及神经星状细胞分化。


  按成骨能力,MSC可分为确定性骨祖细胞(EFPC)和诱导性骨祖细胞(GFPC)。前者不依赖细胞与细胞或细胞与间质的相互关系而直接向成骨细胞分化;后者需诱导物的持续存在才能形成骨组织。骨髓中的DFPC分布于骨小梁表面及内、外骨膜;而GFPC能经血循环到达利于骨诱导分子聚集的区域,经诱导而成为DFPC叫骨髓或其悬液皆能异位形成骨和软骨,组织学检查发现大多数造血干细胞已经死亡,成骨的仅是少量存活的基质细胞叫用酶法或机械力作用骨髓后形成的单细胞悬液依然有成骨能力叫骨膜不同于具有流动性的骨髓,组织结构上分内、外两层。内层疏松,富含骨生成细胞;外层致密,细胞成分少。骨膜中的未分化间充质细胞依赖于局部机械性、细胞和生化刺激性因素分化为成骨细胞或软骨细胞。早已发现被切成碎屑的骨膜注入皮下或肌肉中也能成骨。
  MSC能附壁生长,形成均匀的集落或融合 层。根据这一特性,培养时可筛选掉血细胞,而 且造血干细胞和血管内皮细胞在缺乏生长因子的 条件下难长期生长,会发生自行死亡或退变世。最 终得到的细胞主要为成纤维细胞样细胞。早期,这 些细胞形成的集落形态相似。细胞集落由单细胞 增殖而成,传代一次后则表现为细胞集落生长减 少,细胞形似纺锤状。培养时的细胞密度与形成 的集落数呈线性正相关。这种集落性生长的细胞 即称为CFU-F。培养后能形成含多于接种时50个 细胞的集落总和称为集落形成效力(colony form ing efficiency,CFE)。CFL随年龄的增长而下降, 这种改变可能反映出不同年龄组间骨细胞分化和 骨组织修复能力的差异。
  MSC经移植培养后仍能存活。骨髓源性的MSC经传代培养分20次后仍具有成骨的能力, 只是成骨所需的时间随培养传代次数的增加而相 应延长。骨膜源性的MSC培养到第8代依然能 成骨,且骨膜或骨髓源性的MSC经冻存复苏 后,它的成骨能力不受影响。

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